　　甲基紅(MR)試驗：腸桿菌科的細菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖，產生丙酮酸，丙酮酸再被分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大腸桿菌分解丙酮酸，次生的酸類較多，pH為4.5或更低，甲基紅呈現紅色(陽性)。在產氣桿菌的培養液中一部分丙酮酸變為中性的乙酰甲基甲醇，生成的酸類較少，pH在5.4以上，甲基紅呈現桔黃色(陰性)。

　　乙酰甲基甲醇生成試驗(V—P試驗)：細菌發酵葡萄糖生成丙酮酸，某些細菌可使丙酮酸脫羧形成乙酰甲基甲醇。在堿性溶液中，乙酰甲基甲醇可在空氣中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再與蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成紅色化合物。試驗中加入α—萘酚是作催化劑，使反應的顏色加深，提高反應的敏感性。

　　緩沖葡萄糖蛋白胨水配方(每升)：

　　磷酸氫二鉀 5g

　　多胨 7g

　　葡萄糖 5g

　　最終pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取本品17g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝試管每管1mL，121℃高壓滅菌15min。

　　2、甲基紅(MR)試驗

　　A：取少量待檢菌的新鮮純培養物接種本培養基中，于36±1℃培養2—5d，

　　哈夫尼亞菌則應在22—25℃培養。

　　B：48h取出部分培養液，滴加(029040)甲基紅試劑三滴，立即觀察結果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性。

　　3、V—P試驗

　　A：取待檢菌的新鮮純培養物接種本培養基中，于36±1℃培養2—4d，哈夫尼亞菌則應在22—25℃培養。

　　B：48h后取出部分培養液，按順序加入1/2培養液體積的(029050)VP試劑甲液和1/5體積的乙液充分搖勻試管，觀察結果。陽性者應立刻或數分鐘內出現紅色，如為陰性，應放在36±1℃下培養4h后再進行觀察。

　　質量控制：

　　本品接種后于36±1℃培養48h，滴加試劑，生化特征如下：

緩沖葡萄糖蛋白胨水

　　貯存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規格：250g

　　參考文獻：

　　1.GB/T4789.4-2003 中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗沙門氏菌檢驗

　　2.GB/T4789.28-2003中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗染色法，培養基和試劑

　　3.GB/T4789.4-2008 中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗沙門氏菌檢驗

　　4.GB/T4789.38-2008 中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗大腸桿菌計數

　　5.GB/T4789.30-2010 中華人民共和國國家標準食品安全國家標準食品衛生微生物檢驗大腸桿菌計數

　　6.《中華人民共和國藥典》2010年版附錄XI J 微生物限度檢查。

　　7. SN/T 0184-93 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準進出口食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢驗

　　8. SN/T 0184.1-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準進出口食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢驗

　　9. SN 0169-1992中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法

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