部分細胞在傳代后時，會有以下現象：細胞內會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養基漂浮一些死細胞或者細胞長的極慢。出現以上現象時，可以咨詢本公司技術人員此現象是否正常及相關處理方式，不要頻繁換液，大多數細胞1周換液2-3次即可。
細胞碎片較多、背景較臟時，貼壁細胞用PBS漂洗兩次、懸浮細胞打散后低速離心（900rpm，3min）能有效改善。
傳代比例建議1:2-1:3，長得比較快的細胞可以1：3，比較慢的按1:2傳代。傳代后，建議不要使用傳代前培養所使用的培養基，會有大量細胞碎片甚至導致細胞死亡的風險。
細胞狀態不好或者生長極慢的時候，可以通過增加血清濃度調整細胞狀態及生長速度。
請不要隨意更換培養基，因實驗需要，可以逐步馴化。

懸浮傳代：混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用*培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。

細胞凍存

<1>凍存操作

凍存液配方：建議使用92%FBS+8%DMSO，客戶自身實驗室所使用的凍存液也可以適用，血清濃度不低于30%，DMSO含量不高于12%即可。
收集細胞按照以上細胞傳代步驟操作至第④步后，將細胞懸液收集入15mL離心管，離心（1200rpm，3min）；
棄上清，加入配制好的凍存液，重懸細胞，懸液加入無菌凍存管中；
將凍存管在4℃靜置10min，后將之正置于室溫下的厚壁有蓋泡沫盒中，蓋緊盒蓋，放入-80℃冰箱過夜，第二天放入液氮即可長期保存。

<2>相關問題

10cm皿的細胞長滿一般可以凍存2-3管，部分細胞長的比較慢，凍存的細胞密度要稍微大點，以防止復蘇后生長困難。
凍存液中含的DMSO請使用細胞級DMSO，同時濃度不要太高。部分細胞在10%DMSO條件下凍存會死亡，所以DMSO濃度5%-8%是比較推薦的濃度。
細胞凍存及復蘇遵循慢凍快融的原則，即凍存時溫度不能急劇下降，應控制溫度緩慢下降。復蘇時應快速融化，融化后盡快加入培養基中。
凍存時建議設置凍存檢測，即取0.2-0.3mL的凍存液重懸的細胞于一個凍存管中，與正常體積凍存的細胞共同凍存，至液氮后復蘇檢查凍存結果。凍檢合格前，留一部分細胞繼續培養，以防萬一。

另外，我們提供各種不同濃度的單標及混標定制服務，包含【十大系列】（真誠合作，誠招代理）：

· 中藥對照品

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公司簡介：

中國標準物質網隸屬于北京普天同創生物科技有限公司，是國內最早的專業化標準物質信息平臺。創建以來，一直專注于標準物質的推廣與銷售，是多家知名標準物質研制單位和分析儀器公司的代理商，代理銷售國內外數萬種標準物質和標準樣品，同時經營各類精細化工產品及計量設備，業務遍及國內外眾多檢測機構、科研院校和工廠企業，在業界具有較強的影響力。

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